(VI) PHƯƠNG PHÁP TÁCH CHIẾT MÀNG SINH HỌC TỪ BỀ MẶT VI NHỰA

(VI) Sáng chế này cung cấp một quy trình tối ưu, có thể tái lập để tách chiết màng sinh học từ bề mặt vi nhựa nhằm phục vụ nghiên cứu quần xã vi sinh vật trên vi nhựa. Quy trình kết hợp tách chiết có hỗ trợ chất hoạt động bề mặt với các phương pháp cơ học (siêu âm và lắc xoáy), cho phép tách màng sinh học từ vi nhựa với sự phá vỡ tế bào tối thiểu.
Quy trình sử dụng dung dịch đệm phosphate (PBS) có bổ sung 0,1% Tween 80, siêu âm tần số 40 kHz trong 10 phút và lắc xoáy với hạt thủy tinh theo trình tự hai chu kỳ xử lý. Với 100-150 mảnh vi nhựa, quy trình đạt hiệu suất thu hồi vi sinh vật sống cao nhất 28.020 ± 11.034 CFU/mảnh vi nhựa (tăng 2.950 lần so với phương pháp PBS thông thường), và nồng độ DNA 26,5 ± 3,93 ng/µL đủ cho các phân tích phát hiện vi sinh vật gây bệnh (Aeromonas spp., Salmonella enterica) dựa trên PCR và phân tích cấu trúc quần xã vi sinh vật. Phương pháp được xác thực trên các mẫu vi nhựa thu từ nước mặt và trầm tích ở các địa điểm khác nhau, phù hợp cho các nghiên cứu về sinh thái plastisphere, đánh giá vi sinh vật gây bệnh và phân tích gen kháng kháng sinh. Phương pháp có ưu điểm đơn giản, không yêu cầu thiết bị phức tạp và có chi phí thấp, phù hợp triển khai tại các phòng thí nghiệm cơ bản.